Качественная и количественная оценка транскриптов p210, p230, p190 химерного гена BCR-ABL (П)

Качественная и количественная оценка транскриптов p210, p230 и p190 химерного гена BCR-ABL является важным этапом диагностики и мониторинга онкогематологических заболеваний - хронического миелоидного лейкоза и острого лимфобластного лейкоза. Качественный анализ выявляет наличие транскриптов, в то время как количественный определяет их количество, что позволяет оценить эффективность лечения, наличие минимальной остаточной болезни и риск рецидива. BCR-ABL представляет собой реципрокную транслокацию между хромосомами 9 и 22 t(9;22), которая лежит в основе молекулярного патогенеза хронического миелоидного лейкоза (ХМЛ) (95%), острого лимфобластного лейкоза (ОЛЛ) (15-30% случаев у взрослых и 2-10% – у детей), и острого миелоидного лейкоза (ОМЛ) (1%). Образующийся в результате транслокации химерный ген экспрессируется как единое целое с формированием патологического белка, обладающего многократно увеличенной тирозинкиназной активностью, чем нормальный предшественник – тирозинкиназа ABL. Следствием такой трансформации является конститутивное (не зависящее от действия цитокинов) усиление роста и деления клеток и ингибирование их апоптоза. В зависимости от положения точки разрыва хромосом при транслокации t(9;22)(q34;q11) могут образовываться различные варианты транскрипта, считываемого с гена BCR-ABL. Белок BCR-ABL при этом может иметь молекулярную массу 190, 210 и 230 кДа и обозначается р190, р210, p230 соответственно. У подавляющего большинства пациентов с ХМЛ (свыше 95%) обнаруживается белок р210. При этом наиболее частыми являются варианты транскрипта b3a2 (50% случаев) и b2a2 (45% случаев). У малого числа больных определяют варианты b3a3 и b2a3. Белок р190 (варианты е1а2 (более 95% случаев) и е1а3 (редко)) характерен для ОЛЛ, но может присутствовать у больных ХМЛ с BCR-ABL р210 как продукт альтернативного сплайсинга. Крайне редко при ХМЛ образуется белок р230 (варианты е19а2 и е19а3).

Данное исследование включает в себя определение самых распространённых химерных транскриптов (р190, р210, р230), определение количества копий неизменного гена ABL1, определение количества копий химерного гена BCR-ABL1. Исследование выполняется с помощью количественной ПЦР в режиме реального времени с обратной транскрипцией, которая оценивает количество копий мРНК BCR-ABL, сравнивая c внутренним эталонным геном - ABL1. Уровень мутантного гена рассчитывают относительно контрольного в процентах, в соответствии с международной шкалой экспрессии гена BCR-ABL (IS), или по уровню снижения в логарифмах (в 10 раз – 1 log, в 100 раз – 2 log) по сравнению с выявленным до начала лечения.

Что определяет:
Анализ выявляет транскрипты p210, p230 и p190 химерного гена BCR-ABL при хроническом миелоидном лейкозе и BCR-ABL-положительном остром лимфобластном лейкозе.

Исследование рекомендуют при наличии у пациента или родни наследственных болезней и характерных признаков, при планировании беременности и оценке риска для потомства, при необъяснимых состояниях с подозрением на генетическую причину, для уточнения диагноза, подбора терапии и каскадного обследования родственников носителя.

Материал — кровь из вены. Оптимально приходить в первой половине дня, натощак или выдержав 3–4 часа после необильного приёма пищи; воду пить разрешается. За сутки желательно не перегружать себя жирной едой, спиртным и тяжёлыми тренировками, а непосредственно перед процедурой несколько минут посидеть в спокойной обстановке. О принимаемых препаратах и добавках стоит предупредить врача. Кровь не сдают сразу после физиопроцедур и рентгенологических исследований.